Caracterisation de fractions enrichies en synaptosomes de fibres moussues d'hippocampes de rats : etude histologique et biochimique a partir d'hippocampes controles et irradies en periode neonatale

Cette these a pour objet de caracteriser sur le plan biochimique la synapse des fibres moussues (fm) de la formation hippocampique de rat. Nous avons adapte la procedure de fractionnement subcellulaire, rapide et isotonique, sur gradient de percoll pour la preparation des synaptosomes des fm d'hippocampes de rats. Nous avons caracterise deux fractions enrichies en synaptosomes des fm, les fractions pii et piii ; la fraction piii est la plus enrichie en marqueur des fm, la dynorphine et le zinc, et presente la plus grande proportion de synaptosomes des fm morphologiquement bien preserves (75%). La quantite de dynorphine et de zinc chute approximativement de 90% dans les fractions pii et piii, preparees a partir d'hippocampes adultes irradies en periode neonatale, afin de detruire les cellules granulaires et les fm. Ces resultats indiquent que l'hippocampe adulte irradie est le controle negatif le plus approprie pour l'etude biochimique des synaptosomes des fm. Nous avons montre que les synaptosomes des fm contiennent et coliberent du gaba et du glutamate ; la coliberation de glutamate et de gaba dans une synapse de type excitatrice est un paradoxe. Nous avons mis en evidence que la fraction piii presente la plus forte activite mitotique et une activite de croissance neuritique. L'activite mitotique est induite par un (des) facteur(s) de nature peptidique. La presence de facteurs trophiques au niveau de cette synapse suggere qu'ils pourraient avoir un role autocrine/paracrine. En conclusion, nous avons, a partir d'une procedure de fractionnement subcellulaire d'homogenats d'hippocampes controles et irradies, developpe les conditions pour permettre la caracterisation biochimique de cette synapse