Atividade Antiproliferativa de Benzaldeído Canfeno Tiossemicarbazonas em Células de Melanoma Humano (SK-MEL-37)

As tiossemicarbazonas sao compostos de consideravel interesse cientifico devido as suas importantes propriedades biologicas, tais como antitumoral, antimicrobiana, antiviral, antiprotozoaria, dentre outras. Os compostos estudados apresentam o monoterpeno natural canfeno na posicao R4 e o benzaldeido em R2, com substituicao no anel por diferentes grupos (R), o que confere ao presente trabalho um carater inedito. Dessa forma, foram apresentados para este estudo onze diferentes compostos derivados de benzaldeido canfeno tiossemicarbazona: benzaldeido canfeno tiossecarbazona, p-metil benzaldeido canfeno tiossemicarbazona, p-metoxi benzaldeido canfeno tiossemicarbazona, o-cloro benzaldeido canfeno tiossemicarbazona, m-cloro benzaldeido canfeno tiossemicarbazona, p-cloro benzaldeido canfeno tiossemicarbazona, onitro benzaldeido canfeno tiossemicarbazona, m-nitro benzaldeido canfeno tiossemicarbazona, p-nitro benzaldeido canfeno tiossemicarbazona, p-dimetilamino benzaldeido canfeno tiossemicarbazona e p-hidroxi benzaldeido canfeno tiossemicarbazona, alem de isotiocianato canfeno e canfeno tiossemicarbazida. Os experimentos foram realizados in vitro utilizando-se celulas de melanoma humano (SKMel- 37), visto que o melanoma e o tipo mais grave de câncer de pele devido a sua alta possibilidade de metastase e resistencia a inducao de apoptose por drogas antineoplasicas. Inicialmente, realizamos um screening visual observando-se o desprendimento de mais de 85% do total das celulas, apos tratamento com a concentracao unica de 100 μM. Dessa analise, foram selecionados seis compostos: benzaldeido canfeno tiossemicarbazona, mcloro- benzaldeido canfeno tiossemicarbazona, m-nitro-benzaldeido canfeno tiossemicarbazona, p-dimetilamino-benzaldeido canfeno tiossemicarbazona, p-hidroxibenzaldeido canfeno tiossemicarbazona e p-metoxi benzaldeido canfeno tiossemicarbazona. A analise morfologica das celulas tratadas e coradas com Giemsa e observadas atraves de microscopio optico invertido em contraste de fase demonstrou intensa vacuolizacao celular e fragmentacao nuclear. Na analise da viabilidade celular, atraves do ensaio colorimetrico do MTT, os compostos apresentaram valores de IC50 (Concentracao Inibitoria para 50% das celulas) entre 12,84 μM e 32,18 μM, valores que se encontram abaixo do descrito na literatura para compostos com acao antineoplasica. A analise da fragmentacao nuclear atraves de microscopia de fluorescencia foi realizada pela incorporacao de iodeto de propidio. Observamos, em diferentes tempos, o aumento progressivo dos danos celulares e a fragmentacao nuclear pronunciada apos o desprendimento das celulas. A analise de fragmentacao de DNA por eletroforese em gel de agarose revelou de maneira inequivoca que a acao citotoxica observada ocorre por apoptose. Os resultados obtidos demonstraram que seis compostos derivados do benzaldeido canfeno tiossemicarbazonas apresentaram atividade citotoxica em celulas de melanoma humano (SK-Mel-37) in vitro, e sao candidatos promissores para as analises futuras visando a sua aplicacao terapeutica.