不同来源的猪滋养层(TR)细胞基因表达的比较

滋养层（trophoblast，TR）在胚胎植入和胎盘发育中有重要作用，TR细胞分化和谱系形成的分子机制是研究胎盘发育的重要基础。为了比较体外获得的TR细胞与猪（5wscrofa）体内TR细胞是否具有差异，从猪怀孕子宫中取得胎盘组织，并同时分离胎盘组织细胞进行体外培养，利用qRT-PCR检测胎盘组织及其细胞以及猪的体外受精（invitrofertilization，IVF）囊胚来源TR（IVF．TR）细胞相关基因表达水平，并对其进行比较。免疫荧光染色结果显示，猪IvF．TR细胞具有典型的滋养层细胞特点，呈上皮样形态，表达角蛋白18（keratin18，KRH8）、角蛋白7（keratin7，KRTT）和胚胎阶段特异性抗原（stagespecificembryonicantigen1，SSEAl）等滋养层细胞的标志因子。形态观察结果显示，猪的胎盘为弥散的上皮绒毛膜胎盘，胎盘母体一侧有许多凸起与子宫壁贴附，较易剥离获得；由猪胎儿胎盘组织分离的细胞，为细长的梭形和上皮样形态，生长缓慢，最多可传2代。qRT-PCR检测显示，不同来源的TR细胞，基因的表达存在差异，在胎盘组织中的尾型同源盒转录因子2（caudalhomeoboxtranscriptionfactor2，CDX2）、妊娠相关糖蛋白（pregnancy—associatedglycoprotein，PAa和GATA结合蛋白3（GATAbindingprotein3，GATA3）的表达量要显著高于IVF-TR细胞(P〈0．05），而心脏和神经嵴衍生物1（heartandneuralcrestderivativesexpressed1，HANDl）和钙粘蛋白3（cadherin3，CDH3）基因要显著低于IVF-TR细胞（P〈0．05）；从胎盘分离培养的细胞，除TEA域家族成员4（TEAdomainfamilymember4。TEAD4）的表达显著高于胎盘组织和IVF-TR（P〈0．05），其余基因的表达水平多比这二者低。结果提示，IVF—TR细胞更接近分化早期的TR细胞，基因表达不同于其胎盘组织中处于分化晚期的成熟TR细胞，而体外分离的胎盘组织细胞与体内组织之间也存在基因表达的差异�