O9 L’Extinction de l’Activité du Promoteur du Gène de l’Insuline Entraîne une Forme Congénitale de Diabète Néonatal Transitoire

Introduction Les formes monogeniques de diabete neonatal non auto-immun (DN) sont caracterisees par de faibles concentrations plasmatiques d'insuline dues a des defauts primitifs des cellules beta pancreatiques. Plusieurs etudes recentes ont montre que des mutations codantes non-synonymes heterozygotes situees dans le gene codant la preproinsuline ( INS ) sont impliquees dans ∼10 % des patients atteints de DN. Le gene INS est regule par de nombreux facteurs de transcription ubiquitaires ou au contraire specifiques de la cellule beta. Nous faisons ici l'hypothese que des mutations homozygotes recessives du promoteur de INS pourraient inactiver ce gene. Materiels et Methodes Le promoteur de INS a ete sequence en deux fragments chez sept patients atteints de DN dont les parents sont consanguins. Des mutations codantes des genes KCNJ11 , ABCC8 et INS , et les anomalies du chromosome 6q24 avaient ete exclues. 350 controles normoglycemiques ont de meme ete sequences. Des experiences cellulaires et moleculaires ont ete realisees apres mutagenese d'un variant identifie a l'etat homozygote, dans un vecteur rapporteur pGL2 contenant le promoteur de INS . Resultats Chez deux patients ayant presente un DN transitoire, nous avons identifie une mutation homozygote c.-331C > G non repertoriee, non presente chez les sujets controles et positionnee sur un motif de fixation des facteurs de transcription GLIS3 et de la famille des KLF. Nous avons montre que la mutation eteignait plus de 90 % de l'activite du promoteur de INS dans la lignee murine de cellules beta INS1. Des etudes d'immunoprecipitation de la chromatine (ChIP) et de retard sur gel vont permettre de determiner quel(s) facteur(s) de transcription KLF et/ou GLIS3 sont impliques dans l'extinction de l'activite du promoteur. Une exploration metabolique des parents porteurs de la mutation heterozygote dans une famille a ete realisee. Conclusion Notre etude montre de facon inedite un nouveau mecanisme implique dans une forme transitoire de diabete tres precoce, via un dysfonctionnement de la regulation transcriptionnelle du gene INS entrainant l'extinction de l'activite de son promoteur.