海兔素对酒精性肝损伤大鼠NF-кB、iNOS及COX-2的影响

目的通过观察酒精性肝损伤大鼠NF-кB p65、i NOS和COX-2的表达,探讨海兔素对酒精性肝损伤的保护机制。方法 （1）8周龄雄性Wistar大鼠,按体重随机分为6组（空白对照组,酒精模型组,阳性对照组,海兔素低、中、高剂量组）,每组10只。各组均采用灌胃方式给药,每日一次,连续6周。除空白对照组每日灌胃生理盐水外,其余各组前2周每日给予50%乙醇8 ml/kg,后4周提高至12 ml/kg。海兔素低、中、高剂量组每日还同时分别给予海兔素50、100和150 mg/kg BW,阳性对照组则每日给予200 mg/kg甘草酸二铵。实验结束后ELISA法检测大鼠血浆中i NOS和COX-2活性。（2）8周龄成年雄性Wistar大鼠45只,按体重随机分为3组,空白对照组每日生理盐水灌胃,酒精模型组和海兔素组每日给予50%乙醇8 ml/kg灌胃2周,然后将剂量提高至12 ml/kg,持续6周。海兔素组每日酒精灌胃前4 h,先给予150 mg/kg海兔素灌胃。8周后经二步胶原酶技术分离培养获取大鼠原代肝细胞,每组大鼠各获得一组原代肝细胞。Western Blot法检测大鼠原代肝细胞NF-кB p65蛋白的表达。结果酒精模型组i NOS与COX-2活性均明显高于空白对照组（P〈0.05）;与酒精模型组相比,海兔素低、中、高剂量组i NOS、COX-2活性均有所降低（P〈0.05）。并且海兔素高剂量组i NOS及COX-2的活性与阳性对照组相比差异无统计学意义。酒精模型组NF-кB p65蛋白的表达明显高于空白对照组（P〈0.05）,是空白对照组的1.5倍;而海兔素干预组NF-кB p65蛋白表达明显被抑制（P〈0.05）,与酒精模型组相比,下降52.7%。结论海兔素可通过抑制NF-кB、i NOS及COX-2的表达,对酒精性肝损伤起到一定的保护作用。