Simultaneous Determination of Methylparaben, Propylparaben, Phenoxyethanol and Chlorphenesin by High Performance Liquid Chromatography

บทคดยอ วตถประสงค: พฒนาและตรวจสอบความถกตองของวธวเคราะหปรมาณสารกนบด 4 ชนด คอ เมทลพาราเบน (methylparaben; MP) โพรพลพาราเบน (propyl-paraben; PP) พนอกซเอทานอล (phenoxyethanol; PE) และคลอรเฟเนซน (chlorphenesin; CH) ดวยวธโครมาโทกราฟเหลวสมรรถนะสง (high performance liquid chromatography; HPLC) วธการศกษา: ศกษาและปรบเปลยนสภาวะของ HPLC  ใหสามารถวเคราะหหาปรมาณสารกนบด 4 ชนด ในเครองสำอาง และตรวจสอบความถกตองของวธวเคราะห ผลการศกษา: สภาวะการวเคราะหดวย HPLC คอ คอลมน C18 (250 mm×4.6 mm, 5 µm) ใช อาซโตไนไตรล และกรดฟอสฟอรกความเขมขน 0.1 % v/v เปนเฟสเคลอนทพรอมกบมการปรบอตราสวน อตราไหลของเฟสเคลอนท คอ 1.5 mL/min. ปรมาณการฉดเปน 10 µL ใชความยาวคลน 270 nm พบ retention time ของ PE คอ 6.8 นาท MP คอ 8.1 นาท CH คอ 10.3 นาท และ PP คอ 14.5 นาท ใชเวลาวเคราะห 30 นาท พบความสมพนธเชงเสนตรงระหวางพนทใตกราฟและความเขมขนของสารละลายมาตรฐาน (R 2 > 0.997) ซง MP, PP, PE และ CH อยในชวงความเขมขน 60 - 300, 12 - 60, 200 - 1000 และ 96 - 480 µg/mL ตามลำดบ ความเขมขนตำสดของสารททดสอบซงเปนทยอมรบได (LOQ) ของ MP, PP, PE และ CH 19.29, 1.50, 66.30 µg/mL และ 22.88 µg/mL ตามลำดบ ความถกตองของวธมรอยละการคนกลบอยในชวง 96.10 – 102.35% ผลความแมนยำมคารอยละสวนเบยงเบนมาตรฐานสมพทธตำกวา 2.0% และปรมาณสาร MP, PP, PE และ CH ในเครองสำอางตวอยางอยในชวงทกระทรวงสาธารณสขกำหนด สรป: วธโครมาโทกราฟเหลวสมรรถนะสงทพฒนาและผานการตรวจสอบความถกตองสามารถใชในการวเคราะหปรมาณเมทลพาราเบน โพรพลพาราเบน พนอกซเอทานอล คลอรเฟเนซน ในเครองสำอางไดอยางมประสทธภาพ คำสำคญ : โครมาโทกราฟเหลวสมรรถนะสง, เมทลพาราเบน, โพรพลพาราเบน, พนอกซเอทานอล, คลอรเฟเนซน, เครองสำอาง Abstract Objective: To develop and validate novel methods for a simultaneous determination of preservatives including methylparaben (MP), propylparaben (PP), phenoxyethanol (PE) and chlorphenesin (CH) by high performance liquid chromatography (HPLC). Methods: Cosmetics products were subject to quantification of preservatives. The system configurations and conditions of the methods were optimized. Method validations were performed for all analytical methods. The method was applied for the quantitative analyses of MP, PP, PE, and CH in cosmetic products. Results: The HPLC system was developed by using C18 column (250 mm×4.6 mm, 5 µm) and gradient elution with acetonitrile and 0.1% aqueous solution of phosphoric acid as a mobile phase at a flow rate of 1.5 mL/min, injection volume of 10 µl at ambient temperature and the UV detection at 270 nm. The retention time of PE, MP, CH and PP was 6.8, 8.1, 10.3, and 14.5 min, respectively with a total run time of 30 min. The linearity ranges of calibration curves were 60 – 300, 12 – 60, 200 – 1,000, and 96 - 480 µg/mL for MP, PP, PE and CH, respectively (R 2 > 0.997). Limit of quantitation (LOQ) were 19.29, 1.50, 66.30, and 22.88 µg/mL for MP, PP, PE and CH, respectively. The accuracy of this method was determined by recovery studies and mean recoveries were 96.10 – 102.35% and the %RSD for the precision study were less than 2.0%. We found acceptable ranges of MP, PP, PE, and CH in cosmetic products as mandated by the Thai FDA regulation. Conclusion: HPLC was developed and validated. This method was successfully applied to determine MP, PP, PE, and CH in cosmetic products. Keywords: high performance liquid chromatography, methylparaben, propylparaben, phenoxyethanol, chlorphenesin, cosmetics