Thigmomorphogenese de la bryone : intervention du calcium et des annexines dans la transduction d'un signal mecanique

Une stimulation mecanique effectuee sur un entre-nud jeune de bryonia dioica provoque une delocalisation tres rapide de l'ion calcium lie a la membrane plasmique (30 secondes apres le stimulus). La recherche de proteines mediatrices du signal calcium a conduit a l'etude de proteines se fixant aux phospholipides des membranes de facon calcium-dependante: les annexines. L'extraction de ces proteines est basee sur la reversibilite de leur accrochage aux phospholipides acides des membranes a l'aide de chelateurs de l'ion calcium. Une proteine de 35 kda a ete utilisee pour l'obtention d'anticorps polyclonaux qui reconnaissent, en plus de la proteine p35, d'autres proteines de 23, 33 et 68 kda dont les poids moleculaires correspondent a des annexines vegetales connues. Les proteines p33 et p35 sont reconnues par des anticorps anti-annexines-like de mais. Une etude immunocytochimique montre une delocalisation des annexines du cytosol vers les membranes, 30 minutes apres la stimulation mecanique. Parallelement, une analyse biochimique, comparant la repartition membranaire des annexines a la suite du signal, a ete effectuee par electrophorese en flux continu suivie d'un test elisa. Un immuno-marquage sur membrane de nitrocellulose a montre que la p35 avait la meme localisation membranaire chez les plantes temoins et irritees, au contraire, la p33 n'est presente que chez les plantes irritees. L'ensemble des donnees montre que la proteine p33 de la bryone intervient dans la mediation du signal calcium a la suite d'un stimulus mecanique