DAPK过表达对HL-60细胞生物学功能及caspase-3表达的影响

目的：探讨死亡相关蛋白激酶（DAPK）过表达对HL-60细胞生物学功能及对caspase-3表达的影响。方法采用RT-PCR技术检测白血病细胞株DAPK基因mRNA的表达。运用真核表达载体pReceiver-M29-DAPK，用脂质体LipofectamineTM 2000介导转染HL-60细胞，研究其过表达对白血病细胞凋亡、细胞周期及分化的影响，并对caspase-3表达的影响。结果 DAPK基因在K562、Molt4、U937细胞表达阳性，而HL-60细胞则表达阴性。转染pReceiver-M29-DAPK后，应用流式细胞术和Hoechst33342染色可观察到转染后HL-60细胞出现凋亡，凋亡细胞百分率显著增高。PI单染和瑞氏染色法分析观察转染前后的HL-60细胞，各细胞周期及形态均无改变。转染后caspase-3的表达水平显著增高。结论 DAPK基因过表达的HL-60细胞凋亡增强，但对HL-60细胞周期和细胞分化无影响。Caspase-3可能参与了凋亡调控。