001 - Cellules souches mésenchymateuses et cicatrisation cornéenne.

Objectifs Le but de cette etude est d’evaluer le potentiel therapeutique des cellules souches mesenchymateuses au cours de la cicatrisation corneenne. Materiel et Methodes Des co-cultures de cellules souches mesenchymateuses (CSM) exprimant une Green fluorescent protein (GFP) et des cellules epitheliales corneennes humaines (HCLE) ont ete realisees et le phenotype des CSM (Cytokeratines, beta-catenine et E-cadherine) a ete etudie en immunohistochimie. L’effet therapeutique des CSM en injection sous conjonctivale a ete etudie dans un modele de brulure chimique chez le rat. La transparence et la neovascularisation corneenne ont ete analysees a la lampe a fente, en histologie et immunohistochimie. Resultats Apres 7 jours de co-culture de GFP-MSC et de HCLE, une sous population de cellules exprimant la GFP presentaient une modification de leur morphologie, prenant un aspect en « pavage » similaire a celui des cellules epitheliales en culture. Alors que les MSC n’expriment ni les cytokeratines ni la E cadherine en monoculture, ces marqueurs de cellules epitheliales ainsi que l’expression membranaire de la beta-catenine etaient detectables au niveau d’une sous-population de CSM-GFP en co-culture avec les cellules epitheliales. De plus, certaines de ces cellules apparaissaient binucleees, l’un des deux noyaux exprimant l’activite telomerase caracteristique des cellules epitheliales HCLE. Les etudes in vivo chez le rat ont montre une amelioration significative de la transparence et un taux inferieur de neovaisseaux dans le groupe de rat ayant recu une injection de CSM. L’examen histologique et en immunohistochimie a egalement demontre l’amelioration du pronostic dans ce groupe et la survie de GFP-CSM au niveau de la conjonctive jusqu’a un mois apres leur injection. Conclusions En co-culture avec des cellules epitheliales corneennes, certaines MSC peuvent se differencier en cellules de phenotype proche des cellules epitheliales. Ceci etait au moins en partie lie a un mecanisme de fusion des MSC et des HCLE. In vivo, l’injection sous conjonctivale de MSC est associee a une amelioration du pronostic des brulures de la surface oculaire, avec amelioration de la transparence et diminution de l’angiogenese pathologique. Une therapie cellulaire utilisant des MSC apparait donc prometteuse dans la prise en charge de ce type de pathologie. D’autres etudes seront necessaires pour identifier les mecanismes impliques dans cette amelioration clinique.