Protéomique fonctionnelle de la signalisation de la kinase AKT dans le cancer du sein

Une caracteristique essentielle des cellules cancereuses est leur aptitude a survivre aux environnements hostiles. Sur differentes cellules de cancer du sein, nous avons etudie les effets du fibroblast growth factor-2 (FGF-2) sur l'apoptose induite par le ceramide C2 et les drogues chimiotherapeutiques 5-FU, campthotecine et etoposide. Par emploi d'inhibiteurs pharmacologiques, de dominants negatifs et de siRNA, nous avons montre que la voie PI3K/Akt est essentielle a la signalisation antiapoptotique du FGF-2. Nous avons ensuite etudie la signalisation de Akt par proteomique : co-immunoprecipitation, separation des partenaires en SDS-PAGE ou 2DE et identification par spectrometrie de masse. Les nouveaux partenaires de signalisation de Akt que nous avons caracterises sont IkB kinasebeta (IKKbeta), la valosin-containing protein (VCP) et l'actine qui sont phosphoryles par Akt lors d'une stimulation par les facteurs de croissance. La microscopie confocale a permis de confirmer ces interactions. L'identification de l' actine comme substrat deAkt fournit un lien entre action des facteurs de croissance et remaniement du cytosquelette. L'ensemble de ce travail permet de mieux definir la signalisation de la survie des cellules de cancer du sein et de proposer VCP comme cible therapeutique.