Etude du réseau de régulation de la sporulation chez Clostridium difficile

Clostridium difficile est un bacille a Gram positif anaerobie strict et sporule, responsable de diarrhees post-antibiotiques. Peu de donnees existent sur les processus cellulaires induits a rentree en phase stationnaire de maniere concomitante a la synthese des toxines et sur les reseaux de regulation controlant la phase stationnaire et la sporulation. Nous avons construit un mutant sigH afin de determiner le role de SigH, qui est un facteur sigma alternatif permettant l'expression de genes de phase de transition et de l'initiation de la sporulation chez B. Subtilis. Nous avons compare les profils d'expression de la souche 630Aerm et du mutant sigH en debut de phase stationnaire. Chez C. Difficile, SigH regule l'expression de nombreux genes impliques dans la motilite, la sporulation, la division cellulaire, la virulence et le metabolisme. Enfin, l'expression des genes de toxines est regulee negativement par SigH. Nous nous sommes ensuite interesses a la cascade de regulation de la sporulation chez C. Difficile, qui implique 4 facteurs sigma chez B. Subtilis : SigF, SigE, SigG et SigK. Nous avons compare les profils d'expression ; des mutants sigF, sigE, sigG et sigK et de la souche 630Aerm. Nous avons ainsi defini les regulons de chacun de ces facteurs sigma et montre que chez C. Difficile, le regulon SigE n'est pas sous la dependance stricte de SigF et que SigG n'est pas necessaire a l'activite de SigK. Nous avons aussi analyse le reseau de regulation dans chaque compartimeht de la spore et etudie le role des regulateurs SpoIIID et SpoVT. Ce travail a mis en evidence une communication moins stricte entre les deux compartiments de la spore que chez B. Subtilis.