橡胶树中碱性转化酶 HbNIN9 表达及酶学特性分析

转化酶作为蔗糖分解代谢的关键酶，在植物生长发育、生物与非生物胁迫响应等生理过程中发挥重要作用。基于对橡胶树不同组织转录组数据库的分析，本研究克隆了一个在橡胶树种子中有较高丰度表达的中碱性转化酶基因 HbNIN9 ；系统进化分析和在线软件预测均显示其亚细胞定位为线粒体，属于中碱性转化酶 琢 亚族成员；利用原核表达体系成功获得 HbNIN9 优化表达的重组蛋白，优化表达的诱导条件为 0.5 mmol / L IPTG ， 25 ℃ 培养 6 h ；酶学特性分析表明， HbNIN9 蛋白酶活反应的最适温度为 45 ℃ ，最适 pH 值为 7.5 ，米氏常数 Km 值为 18.09 mmol / L 。本研究从蛋白水平证实了 HbNIN9 为典型的中碱性转化酶，有助于深入揭示线粒体型转化酶在橡胶树种子糖代谢中生理功能，丰富橡胶树中碱性转化酶家族成员的生理生化研究。