Les plaquettes humaines biotinylées, une approche prometteuse pour leur détection in vivo lors d’essais cliniques

Les procedes de preparation de plaquettes (PL) a usage transfusionnel sont en constante evolution ce qui peut necessiter des evaluations in vivo au travers d’essais cliniques dans lesquels il faut pouvoir distinguer les PL transfusees des PL du receveur. Un marquage des PL a la biotine (Bio) permettrait de reperer simultanement plusieurs populations de cellules couvertes de differentes densites de Bio, comme decrit pour des globules rouges (Mock et al, Transfusion, 2018). Etonnamment une seule etude decrit la transfusion de BioPL (Stohlawetz et al., Transfusion, 1999). Objectif (1) decrire un protocole BPF pour marquer des PL humaines a 2 densites de Biot, (2) verifier l’impact de la Bio sur leurs fonctions, (3) reperer les BioPL dans la circulation de la souris. Methode Des concentres de PL standards sont traitees avec la SulfoNHSBio BPF, depuis peu commerciale. Les fonctions des PL sont testees in vitro. Leur recirculation est evaluee chez la souris immunodeficiente NSG en cytometrie en flux ex vivo. Resultats L’expression de GPIba et GPIIbIIIa n’est pas affectee par la Bio ≤ 10 μg/mL, Les BioPL ont la capacite d’agreger et de secreter en reponse a divers agonistes. Les 2 populations de BioPL sont identifiees chez la souris pendant plus de 48 h. Cette methode de marquage des PL est satisfaisante pour evaluer des produits transfusionnels. Elle permet de s’affranchir de radioisotopes, de suivre simultanement plusieurs populations de PL et, par consequent, de limiter le nombre de volontaires a inclure dans les etudes ( Tableau 1 ).