Possíveis mecanismos para estabelecimento de cultura celular de Apis mellifera ( Linnaeus 1758)

A chamada “Colony Collapse Disorder” (CCD) tem chamado atencao nos ultimos anos devido as grandes perdas no numero de colmeias de Apis mellifera ao redor do mundo. Diversos fatores sao apontados como causadores da CCD: infeccoes virais, fungos, bacterias, acaros, o uso de pesticidas, perda de diversidade genetica e a perda de habitats. Linhagens celulares desenvolvidas, isoladas e cultivadas in vitro vem sendo amplamente utilizadas em estudos bioquimicos, geneticos, medicos, farmacologicos, dentre outros. Diversas linhagens celulares oriundas de insetos vem sendo desenvolvidas ao longo dos anos porem, ha poucos relados de estabelecimentos eficientes de celulas oriundas de abelhas, apesar de tamanha importância economica e ecologica deste inseto. Metodos para se estabelecer uma linhagem em cultura podem ser muitos, desde o estabelecimento de culturas primarias e selecao das que melhor se desenvolvem, suplementacao de meios, mutacao induzidas por gentes mutagenicos e expressao de oncogenes. Estes oncogenes sao responsaveis por alteracoes na maquinaria celular, fazendo com que muitos dos resultados de sua expressao seja a proliferacao celular descontrolada, levando a formacao de tumores. Estas celulas tumorais, devido a sua capacidade de divisoes tidas como infinitas, sao chamadas de imortalizadas. A maioria da metodologia utilizada para estabelecimento de linhagens para A. mellifera baseia-se na modificacao de meios para cultura pre-existentes para insetos e apenas uma relata a transducao e expressao de oncogenes, no caso o c-Myc humano. Destes poucos relatos, somente uma minoria conseguiu manter linhagens sob cultivo por longos periodos, cerca de 3 meses. Nosso grupo esta engajado na busca de novos metodos para estabelecimento eficiente de linhagens celulares de abelhas in vitro. Tres metodologias estao visadas para tal: a transducao de um oncogene para a proteina Ras em A. mellifera; proteina esta responsavel pela sinalizacao de vias que levam a ativacao de fatores transcricionais responsaveis pela sobrevivencia, proliferacao e diferenciacao celular; a clonagem do gene para a porcao proteica da Telomerase de A. mellifera, e transducao com promotores que possibilitem uma expressao constitutiva; isso faria com que os telomeros fossem mantidos nas extremidades dos cromossomos, permitindo estabilidade para sucessivos ciclos de divisao celular; e tambem a modificacao de meios pre-existentes para culturas com a adicao de mel e de geleia real, substituindo o soro fetal bovino, sendo ambos os produtos oriundos da propria colmeia e ricos em nutrientes, que suprem grande parte da dieta de embrioes durante o desenvolvimento. Com o uso desta metodologia, pretende-se estabelecer eficientemente uma cultura celular de A. mellifera que permita sua manutencao por longos periodos de tempo, possibilitando estudos aprofundados sobre patogenos, agentes quimicos e geneticos, que ajudariam na busca por solucoes para a CCD.