实时荧光定量PCR分析海水浸泡伤大鼠小肠组织NF-κB及IκB mRNA表达水平

目的 建立检测大鼠小肠组织NF-κB及IκB-α mRNA表达水平的SYBR Green 实时定量（real time）PCR实验技术,观察海水浸泡伤大鼠小肠组织NF-κB及IκB-α mRNA表达水平的动态变化.方法 Wistar大鼠63只,随机分为三组：空白对照组（C组,n=7）,创伤组（W组,分为12、24、48、72 h四组,每组n=7）,创伤＋海水浸泡组（W＋S组,分为12、24、48、72 h四组,每组n=7）.W组采用腹部开放伤模型,W＋S组在腹部开放伤的基础上海水浸泡1 h.采用real-time PCR方法测定三组实验动物小肠组织NF-κB及IκB-α mRNA表达量并进行统计分析和组间比较.结果 与W组相比,W＋S组大鼠小肠组织NF-κB mRNA在72 h后出现显著表达水平上调（P〈0.01）,W组和W＋S组大鼠小肠组织IκB-α mRNA在48 h后都出现显著表达水平上调,但W＋S组在72 h IκB-α mRNA表达上调更为显著（P〈0.01）.结论 在海水浸泡伤的后期（＞72 h）,NF-κB mRNA表达明显上调,促进NF-κB蛋白水平的合成,从而进一步放大NF-κB信号转导途径,诱导炎症反应.同时, IκB-α mRNA表达水平的也明显上调,促使IκB-α蛋白表达增加,以尽量下调细胞核中NF-κB的活性.