La biophotonique au service de l’identification de marqueurs pronostiques intracellulaires

Resume Le projet vise a developper une solution d’imagerie hybride combinant en un meme instrument microspectroscopie Raman et imagerie multispectrale pour le diagnostic et l’etablissement des facteurs pronostiques d’une tumeur. Les lymphocytes de 24 patients presentant une leucemie lymphoide chronique hyperleucocytaire et ceux de 11 individus sains ont ete etudies avec en moyenne 90 cellules par prelevement. Le reperage s’effectue en microscopie optique et les noyaux sont analyses par microspectroscopie Raman a partir de frottis sanguins etales sur lame de verre. Finalement, les cellules correspondantes sont imagees sous forme de piles multi-Z pour huit bandes spectrales reparties dans le visible. Une classification des donnees Raman par un algorithme de classification supervise (separateur a vastes marges) a permis d’identifier une signature moleculaire permettant de classer les lymphocytes et les autres elements nuclees du sang avec une sensibilite de 99,6 % et une specificite de 98,8 %. Cet algorithme a ete utilise pour mettre au point un modele permettant de distinguer individus sains et leucemiques et caracterise par une sensibilite de 95 % pour une specificite de 87,5 % sur les spectres constituant la base de tests (1540 spectres issus de 11 patients atteints d’une leucemie lymphoide chronique et 516 spectres issus de sept individus sains). Le projet IHMO a montre le potentiel de la spectroscopie Raman pour realiser une classification cellulaire. Les descripteurs morphologiques extraits de l’imagerie produisent une deuxieme classification qui reste a evaluer. La solution pourra etre etendue en cytohematologie, mais necessitera des developpements complementaires pour son application en anatomo-cytopathologie.