Performances du séquençage haut débit du TCR-bêta pour le diagnostic de lymphome T cutané

Introduction Le diagnostic precoce de lymphome T cutane n’est pas toujours aise et repose sur un faisceau d’arguments cliniques, biologiques, histologiques et moleculaires. Le sequencage haut debit du TCR-beta permet par la reconnaissance de sequences CDR3 specifiques l’identification et la quantification de chaque clone T present dans un echantillon donne. Il existe encore peu d’etudes a ce sujet avec des resultats discordants et aucun critere diagnostic valide. Notre etude avait comme but de determiner pour cette technique des seuils optimaux pour les valeurs suivantes : frequence du clone T majoritaire dans la peau rapportee a l’echantillon total (TCF) et ratio entre la frequence du premier et du deuxieme clone T (RPF), avec comme objectif de developper de nouveaux algorithmes pour le diagnostic de lymphome T cutane. Materiel et methodes Nous avons analyse retrospectivement les donnees obtenues par le sequencage haut debit du TCR-beta dans des echantillons de biopsies cutanees realisees chez 144 patients entre 2013 et 2020. Le diagnostic de lymphome T cutane etait base sur des criteres internationaux valides. Nous avons inclus 101 echantillons de patients ayant un diagnostic de lymphome T confirme dont 47 MF stade I-IIA, 1 stade IIB, 4 stade III, 35 syndromes de Sezary, 8 lymphomes T agressifs (PTCL NOS ou CD8+) et 6 lymphoproliferations CD30+ (3 papuloses lymphomatoides et 3 lymphomes anaplasiques a grandes cellules). En complement 43 echantillons provenant de patients avec des pathologies inflammatoires etaient inclus. Les performances de la technique ont ete etudiees a l’aide de courbes ROC. Resultats Les meilleures performances diagnostiques etaient obtenues pour le TCF avec une AUC de 0,957 versus 0,929 pour le RPF. Les valeurs de TCF et RPF pour chaque categorie ont ete modelisees. Avec des seuils de TCF de 5 % et 25 %,la specificite pour le diagnostic etait de 95 % et 100 %, et la sensibilite de 89 % et 50 %. Il existait une correlation significative entre le TCF et l’importance de l’atteinte sanguine chez les patients SS (cellules TCD4 + CD26−, r = 0,59, p = 0,0008 ; T CD4 + CD7−, r = 0,45, p = 0,01 ; T CD4 + CD158k+, r = 0,4, p = 0,03) Discussion Le TCF obtenu par HTS-TRB est un critere robuste pour le diagnostic de lymphome T cutane et particulierement pour celui de MF, avec une sp de 95 % et une se de 89 % pour un seuil de 5 %. Une telle specificite permettrait un diagnostic precoce de lymphome T cutane dans des cas difficiles. Ces resultats sont meilleurs que ceux obtenus a l’aide de la PCR classique sur gel du TCR gamma qui sont entaches de nombreux faux negatifs et faux positifs. Des etudes multicentriques prospectives seraient necessaires pour la definition de criteres valides internationaux pour l’usage de cette technique dans le diagnostic de lymphome T cutane.