Expressão do Gene L1 de HPV-16 em Pichia pastoris

A infeccao persistente por tipos oncogenicos de Papilomavirus Humano (HPV) e necessaria para o desenvolvimento do câncer cervical e colabora no estabelecimento de outros tumores anogenitais e orofaringeos. A utilizacao de Virus-like Particles (VLPs) produzidas a partir da superexpressao da proteina L1 do capsideo viral em sistemas recombinantes e a base das atuais vacinas anti-HPV. Apesar de eficazes, o elevado custo de producao e o baixo espectro de acao de tais vacinas comprometem seu estabelecimento. Neste trabalho avaliamos a producao extracelular da proteina L1 de HPV-16 a partir de celulas de Pichia pastoris e mediante a utilizacao dos sistemas baseados no promotor induzivel AOX1 e no promotor constitutivo PGK1. A secrecao da proteina L1 no meio de cultura foi confirmada atraves do emprego de anticorpo monoclonal anti-L1 em ensaios de colony, dot e western blotting. Embora otimizacoes sejam necessarias para aumentar o rendimento de producao, o sistema nao comercial baseado no promotor constitutivo PGK1 representa uma atrativa plataforma para producao da proteina L1 com fins vacinais.