甲基-β-环糊精对肺泡II型上皮细胞增殖和TGF-β/Smad信号通路的影响

目的观察甲基-β-环糊精（methyl-β-cyclodextrin,MβCD）破坏小窝（caveolae）对肺泡Ⅱ型上皮细胞（AECⅡ）增殖和TGF-β/Smad信号通路的影响。方法分离培养大鼠AECⅡ,免疫荧光双标检测小窝蛋白-1（caveolin-1）和TGF-β受体Ⅰ（TβR-Ⅰ）表达和分布关系。以MβCD（5 mmol/L）破坏AECⅡ细胞膜Caveolae,设空白对照组,非离子去污剂法提取脂筏检测TβR-Ⅰ与Caveolin-1在细胞膜上的分布;Western blot检测Caveolin-1和磷酸化Smad2（pSmad2）表达;四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞增殖能力。结果荧光双标和脂筏提取结果提示TβR-Ⅰ主要分布于Caveolae区域,MβCD破坏Caveolae后,TβR-Ⅰ重新分布于细胞膜上非脂筏区域;MβCD干扰组Caveolin-1蛋白表达（24.53±3.24）%较正常对照组（54.83±5.67）%显著下调（P〈0.01）,而TGF-β/Smad信号通路下游分子pSmad2蛋白表达（10.93±1.11）%较对照组（8.36±0.64）%上调（P〈0.05）;MβCD干扰组细胞增殖率（31.00±4.18）%较对照组（49.20±4.44）%显著降低（P〈0.01）。结论 MβCD破坏Caveolae结构可抑制AECⅡ增殖,其机制可能与TβR-Ⅰ在非脂筏区域的聚集和Caveolin-1下调导致的TGF-β/Smad信号通路增强有关。