丹参酚酸B抑制TLR4-NFκB-TNFα炎症损伤通路防治心肌细胞的缺氧损伤

目的：探讨TLR4-NFκB-TNFα损伤通路和HSP70在体外缺氧培养心肌细胞中的变化规律以及丹参酚酸B的调节作用。方法：分离纯化出生1～3天Wistar乳鼠心肌细胞并复制体外缺氧培养心肌细胞模型。丹参酚酸B（SalB）大、中、小剂量浓度分别为10-5mol·L-1、10-6mol·L-1和10-7mol·L-1并在缺氧培养前6h进行干预。细胞爬片免疫组化法检测tool样受体4（TLR4）和核因子KB（NFKB）蛋白的表达，ELISA法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子仅（TNF0t）和热休克蛋白70（HSPTO）的浓度，分光光度计法检测细胞上清液中丙二醛（MDA）和乳酸脱氢酶（LDH）的含量。结果：与正常组比较，缺氧培养6h后心肌细胞上清液中MDA、LDH、TNFα含量均显著升高（3．71±0．84）VS（1．78±0．56），（561．41±129．31）VS（36．80、±10．22），（89．39±21．65）VS（49．42±4．16），P〈0．055或P〈0．051）；心肌细胞TLR4和NFKB蛋白的表达量也显著升高（P〈0．055或P〈0．051）。与单纯缺氧培养组比较，丹参酚酸B大剂量组MDA含量显著下降（1．94±0．49）VS（3．71±0．84），P〈0．051；大、中、小剂量组LDH含量均显著下降（P〈0．051）；大、中剂量组TNFα含量显著下降（P〈0．055）；丹参酚酸B大、中、小剂量组NFKB及TLR4蛋白的表达面积或强度均有明显的下降（P〈0．055或P〈0．051）。结论：TLR4-NFκB-TNFα炎症通路在缺氧培养6h后即明显激活，该通路的激活在缺氧损伤初期（6h内）是不依赖HSP70存在的。丹参酚酸B预防给药对缺氧培养的体外心肌细胞炎症损伤有明显的保护作用。该作用可能与抑制TLR4-NFκB-TNFα炎症通路有关。