PAPEL DA L-ARGININA NA MOTILIDADE, VIGOR E PEROXIDAÇÃO LIPÍDICA EM ESPERMATOZÓIDES DE BOVINOS CRIOPRESERVADOS DURANTE A CAPACITAÇÃO IN VITRO.

A capacitacao espermatica e um fenomeno ligado a fertilizacao, sendo fundamental no aprimoramento das biotecnicas reprodutivas. Dentre os fatores envolvidos na capacitacao podemos evidenciar o oxido nitrico (NO), uma especie de nitrogenio reativo, sintetizado a partir da L-arginina (L-arg). O objetivo principal foi pesquisar os efeitos do NO na capacitacao in vitro de espermatozoides bovinos por meio da adicao da L-arg no meio capacitante. Foi utilizado semen criopreservado de 3 animais, submetido a centrifugacao (700 x g/10 min) em gradiente de Percoll 45 e 90%. O sedimento foi ressuspendido em meio de lavagem e submetido a nova centrifugacao (200 x g/3 min). O sedimento foi diluido em meio TALP-sp com heparina e colocado na estufa a 38,5oC com atmosfera umidificada com 95% de ar e 5% de CO2 por 4h. Para avaliar a motilidade e o vigor foram adicionados diferentes concentracoes de L-arg (1; 2,5; 5; 10 e 50mM), 0,1mM ODQ e 10mM GMPc ao meio capacitante. A peroxidacao lipidica (PL) foi avaliada utilizado-se kit comercial (Peroxidetect – Sigma) apos a adicao de L-arg (1 e 10mM), 0,1mM de ODQ e 10mM GMPc ao meio capacitante. A adicao de 1 e 2,5 mM de L-arg e 10 mM de GMPc aumentaram a motilidade progressiva dos espermatozoides capacitados em relacao ao controle e demais tratamentos, enquanto as concentracoes de 5, 10 e 50 mM de L-arg diminuiram (P<0,05). A adicao de 0,1 mM de ODQ inibiu o vigor comparado com o controle e demais tratamentos (P<0,05), contudo a adicao de L-Arg reverteu esta acao inibitoria (0,1mM ODQ + 1mM L-arg). A adicao de 1 mM de L-arg e 0,1 mM de ODQ diminuiram a peroxidacao lipidica em relacao ao controle e demais tratamentos (P<0,05). A adicao de 1 mM de L-arg reverteu o efeito inibitorio de 0,1 mM de ODQ no meio capacitante (P<0,05). Apos a capacitacao espermatica em bovinos: 1) a via L-arg/NO/GMPc esta envolvida no controle da motilidade progressiva e vigor; 2) houve efeito dose-resposta da acao da L-arg na diminuicao da PL; 3) a L-arg/NO diminuiu a peroxidacao via inibicao da guanilato ciclase soluvel e nao via GMPc.