Establishment of short segment PCR-ELISA liquid phase hybridization and research of detecting variation of HBV YMDD

目的建立短片段PCR-ELISA技术,检测HBV P基因C区变异位点,以了解拉米呋啶治疗过程中与HBV耐药有关突变株的产生.方法通过定点诱变获得的重组质粒作为标准对照,采用短片段PCR-ELISA方法对拉米呋啶治疗的60例乙肝患者血清标本进行HBV聚合酶P基因的变异检测,同时观察其HBV DNA定量、肝功能指标的变化.结果所测60份血样中有8份检出突变株,经测序证实YMDD变异存在,其中4例由ATG变为GTG,1例变为ATT,3例变为ATC,并出现HBV DNA定量反跳及肝功能的变化.结论短片段PCR-ELISA法监测乙肝病毒YMDD变异,其方法与一般PCR相比,时间仅为其五分之一,且具有更好的特异性.