Experimental study of MAT1 gene silencing mediated by siRNA in pancreatic cancer

目的 了解体外转录法合成的小干扰RNA(siRNA)沉默MAT1基因对胰腺癌的体内体外抗癌效应.方法 用siPORT-脂质体(lipid)中性阳离子脂质体转染由体外转录法合成、Cy3荧光标记的双链siRNA人胰腺癌BxPC3细胞,观察对胰腺癌细胞生长和细胞周期曲线的影响,检测MAT1基因被siRNA沉默后mRNA和蛋白质的表达水平.在裸鼠胰腺癌皮下移植瘤瘤体内直接注射siRNA观察抑瘤效应.结果 合成的4条MAT1-siRNA序列中有一半可显著抑制BxPC3细胞的生长.体外转染MAT1-siRNA 72 h后,BxPC3细胞生长抑制率达34.9%(P＜0.01);83.9%的BxPC3细胞滞留于G0/G1期,而空白对照组仅59.86%(P＜0.01).体外转染MAT1-siRNA 48 h后MAT1-mRNA水平下调了80.12%,72 h后MAT1蛋白质水平下调了50.12%,与各对照组相比差异均有统计学意义(均P＜0.01).MAT1-siRNA注射组裸鼠移植瘤重量和体积均明显低于对照组(均P＜0.05),抑瘤率达42.53%.结论 siRNA介导的MAT1基因沉默在体外实验中显著抑制了胰腺癌细胞的生长,在体内实验中对裸鼠胰腺癌皮下移植瘤产生明显的抑瘤效应。