碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌外排泵M ex AB-OprM 的研究

目的：研究铜绿假单胞菌对碳青霉烯类耐药与外排泵MexAB‐OprM 的相关性。方法琼脂稀释法测定亚胺培南和美罗培南对75株铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度（M IC ），联合外排泵抑制剂M C207110进行外排泵表型的筛选；用反转录‐聚合酶链反应（RT‐PCR）扩增MexAB‐OprM融合蛋白结构基因 mexA以及内参基因rpoD ，并测定其mRNA的表达量，用PCR扩增MexAB‐OprM 相对高表达菌株的外排泵调节基因 mexR、nalC和 nalD ，对扩增产物进行DNA 双向测序；结果进行BLAST比对分析。结果75株铜绿假单胞菌中外排泵表型阳性菌株13株，其中10株细菌的MexAB‐OprM 相对表达量增高，此高表达MexAB‐OprM菌株的调节基因 mexR、nalC及nalD均阳性。其中9株菌 nalC均发生第71位氨基酸突变（甘氨酸→谷氨酸）、8株菌同时还有第209位氨基酸突变（丝氨酸→精氨酸），仅发现1株菌 nalD第158位氨基酸突变（苏氨酸→异亮氨酸），8株菌 mexR发生突变。结论外排泵MexAB‐OprM的高表达在铜绿假单胞菌对碳青霉烯类耐药中可能起到重要作用。MexAB‐OprM的高表达与其调节基因突变相关。