Avances en la fisiología digestiva del robalo blanco (Centropomus undecimalis) en Tabasco, México
2010
El robalo blanco (Centropomus undecimalis, Bloch) es un pez marino de alto valor comercial en el Sureste de Mexico, por lo cual ha sido sobreexplotado mermando sus poblaciones. De esta manera, se han iniciado los estudios para desarrollar su cultivo, donde el entendimiento de la fisiologia digestiva permitira implementar alimentos artificiales que logren mejorar el crecimiento y supervivencia durante su cultivo. El objetivo de esta investigacion es evaluar la capacidad digestiva de C. undecimalis utilizando tecnicas bioquimicas y moleculares. Se tomaron muestras de larvas y juveniles de C. undecimalis para realizar diversos estudios sobre los cambios de las enzimas digestivas (proteasas, lipasas, amilasas y fosfatasas) y su expresion molecular (tripsina, lipasa y ubiquitina), la caracterizacion de proteasas por medio de tecnicas bioquimicas y electroforeticas, asi como la digestibilidad in vitro de ingredientes y alimentos artificiales usando el metodo de pH STAT. El pH optimo de proteasas acidas se encuentra en 2 con alta estabilidad entre 2 y 8, mientras que la temperatura optima es de 75oC con altas estabilidades de 25 a 55oC, la cual fue inhibida en 86% con pepstatin A. Para las proteasas alcalinas el optimo de pH y temperatura fueron de 7 a 11 y 65oC respectivamente, mostrando una elevada resistencia a los cambios de pH y temperatura (4-10 y 35-65oC respectivamente). Estas proteasas se inhibieron con PMSF (60%), ovoalbumina (59%), SBT1 (41%), TLCK (68%), y TPCK (17%), indicando la presencia de serina proteasas, mientras que las metalo proteasas se inhibieron en 40% con EDTA y 85% con 1-10 fenantrolina. El grado de hidrolisis de ingredientes proteinicos mostro que la harina de jaiba, sardina, puerco y sangre de res tienen altos valores para las fases acidas y alcalinas, ademas que la liberacion de aminoacidos fue mayor con la harina de sardina para la fase acida y del hidrolizado de pescado para la fase alcalina. Durante la ontogenia inicial, la tripsina, quimotripsina, L-aminopeptidasa, carboxypeptidasa A, lipasa, amilasa y fosfatasas estan presentes desde la absorcion del vitelo (1 dias post-eclosion, dpe), mostrandose dos picos de actividad entre los 12 y 25 dpe. La Pepsina fue detectada del 34 dpe en adelante. Los zimogramas muestran dos bandas, la primera (26.1 kDa) a los 25 dpe, y la segunda (51.6 kDa) a los 36 dpe. El zimograma de proteasa acida muestra dos bandas (0.32 y 0.51 rf´s) a los 34 dpe. Finalmente, a partir de tejidos de juveniles se lograron amplificar los genes de tripsina, lipasa y ubiquitina, los cuales muestran altas similitudes (>85%) con los mismos genes de otros peces al utilizar el BLAST. De esta manera, el conocimiento de la fisiologia digestiva de C. undecimalis es similar a la de otros peces marinos de habitos alimenticios carnivoros.
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