Bcl-2、C-Raf及双靶点RNAi质粒对HCT-8细胞株增殖的抑制作用

目的研究Bcl-2、C—Raf及双靶点的RNA干扰质粒对人结肠癌HCT-8细胞株增殖的抑制作用。方法利用Ambion公司网上设计软件，分别以Bcl-2和C-Raf为靶标，设计合成63个核苷酸的双链RNA，构建质粒pSilencer 3．1-H1／Bcl-2、pSilencer 3．1-H1／C-Raf及pSilencer 3．1-H1／Bcl-2／C-Raf，分别转染结肠癌细胞株HCT-8，用MTT法检测其对细胞增殖的抑制作用，RT-PCR检测Bcl-2和C-Raf的mRNA转录。结果经MTT法检测，构建的Bcl-2和C-Raf基因及双靶点RNAi质粒3个转染组的细胞存活率均降低，双靶点质粒转染组较两个单靶点转染组细胞存活率明显降低，差异有显著意义。经RT-PCR检测，转染双靶点质粒后，HCT-8细胞中Bcl-2和C-Raf基因的表达均较对照组明显减弱。结论Bcl-2、C-Raf及双靶点RNAi质粒对HCT-8细胞株增殖有抑制作用。