DExt o12 - Laboratório de Microbiologia da FOA e contaminação em cultura de células
2017
O Laboratorio de Microbiologia da Faculdade de Odontologia de Aracatuba-FOA-UNESP realiza exames como cultura e antibiograma e isolamento de microrganismos de pacientes da FOA, de outras instituicoes de ensino superior e o publico externo, conforme a demanda. Porem, nem todas as bacterias sao de facil e/ou rapido cultivo, o que faz com que a identificacao seja realizada pela reacao em cadeia da polimerase (PCR) ou o isolamento exija metodos nao tradicionais, como a utilizacao de condicoes de anaerobiose. Nao raro, realizam-se testes de controle de qualidade de contaminacao microbiana em amostras de materiais de outros laboratorios da FOA. Este trabalho objetivou relatar a avaliacao de contaminacao bacteriana em culturas de celulas, utilizadas em pesquisas laboratoriais. A solicitacao foi realizada apos contato com a instituicao fornecedora das celulas que sugeriu que a cultura poderia estar contaminada e que os pesquisadores deveriam realizar essa averiguacao, pois algumas linhagens fornecidas apresentaram essa condicao. Isso demandaria transporte das amostras e tempo, dentre outros aspectos tecnicos. Assim, a partir das amostras comprometidas, procedeu-se a coleta de sobrenadante, que foi cultivado em agar BHI enriquecido com extrato de levedura e sangue desfibrinado de cavalo, incubado em microaerofilia por 72h, a 37 o C. Apos a analise morfocolonial e morfocelular, com identificacao presuntiva de micoplasmas, procedeu-se a identificacao definitiva por meio de PCR utilizando-se de iniciadores para a classe Mollicutes e para a especie M. salivarium , confirmando-se a identificacao. A eliminacao da contaminacao foi realizada com auxilio de tratamento antimicrobiano especifico. Esses resultados mostram a necessidade de se realizar avaliacoes de rotina para deteccao de contaminacao em culturas de celulas, animais experimentais, reagentes, e mesmo de equipamentos, pois esses contaminantes podem comprometer os ensaios laboratoriais e a confiabilidade dos resultados. Descritores : Tenericutes; Tecnicas de Cultura de Celulas; Contaminacao.
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