鲈鱼6-磷酸葡萄糖酶催化亚基（G6PC）cDNA和5＇侧翼序列的克隆及分析

6-磷酸葡萄糖酶（glucose-6-phosphatase,G6Pase,EC3.1.3.9）催化6-磷酸葡萄糖水解产生磷酸和葡萄糖,即糖异生途径和糖原分解途径的最后一个限速反应。我们用SMARTRACE技术从鲈鱼（Lateolabrax japonicus）肝脏中克隆了6-磷酸葡萄糖酶催化亚基（glucose-6-phosphatase catalytic subunit,G6PC）基因cDNA序列。该序列全长1651bp,5＇端非翻译区75bp,3＇端非翻译区496bp,开放阅读框1080bp,可编码一个由359个氨基酸组成的蛋白,该蛋白理论分子量40.45kD、等电点9.30（GenBank登录号：HQ317736.1）。氨基酸序列分析表明,鲈鱼G6PC与胡瓜鱼（Osmerus mordax）、翘嘴红鲌（Erythroculter ilishaeformis）、慈鲷（Haplochromis nubilus）、斑马鱼（Danio rerio）、黑青斑河鲀（Tetraodon nigroviridis）、金头鲷（Sparus aurata）、非洲爪蟾（Xenopus laevis）、牛（Bos taurus）、人（Homo sapiens）、小鼠（Mus musculus）及大鼠（Rattus norvegicus）11个物种的同源性达58%以上,其中与胡瓜鱼同源性最高,为85%。RT-PCR分析G6PC基因在鲈鱼肌、心、眼、脑、鳃、肝、肠、肾、脂和脾10个组织中的表达,在肝、肠和肾中有较高的表达,在脑和鳃只有微弱的表达。用基因组步移技术克隆了G6PC基因的5＇侧翼区的序列1243bp,表明该序列含有2个TATA box位点,2个胰岛素作用序列（insulin response sequence,IRS）及C/EBPb、CRE-BP、HNF-3b等潜在的转录因子结合位点。本研究结果表明,鲈鱼G6PC基因在肝、肠和肾中有高表达,其5＇侧翼区存在多个转录因子结合位点,该结果为研究G6PC基因的表达调控机制提供了基础资料。