In vitro differentiation of rabbit bone marrow-derived mesenchymal stem cells into condrocytes

目的 探讨体外诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)向软骨方向分化的条件和方法.方法抽取兔股骨骨髓,用密度梯度离心和贴壁分离法分离BMSCs,分别在高密度(1×106/ml)和低密度(1×104/ml)培养条件下用转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导BMSCs向软骨方向分化.倒置显微镜、透射及扫描电子显微镜观察细胞,用免疫组织化学、原位杂交、特殊染色方法检测Ⅱ型胶原及软骨基质成分的表达.结果高密度诱导的BMSCsⅡ型胶原免疫组织化学阳性率为89.2%,Ⅱ型胶原原位杂交阳性率为82.6%,黏多糖特殊染色阳性,低密度诱导的BMSCsⅡ型胶原免疫组织化学阴性,Ⅱ型胶原原位杂交阳性率为3.8%,黏多糖特殊染色阴性.结论 TGF-β1可以诱导BMSCs向软骨方向分化,细胞密度是BMSCs分化的重要影响因素。