延龄草皂苷通过NF-κB/MAPK信号通路调控MMPs表达并抑制骨肉瘤Saos-2细胞的迁移和侵袭

目的：观察延龄草皂苷（diosgeninglucoside，Dgg）对人骨肉瘤Saos-2细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响，并探讨其可能的作用机制。方法：应用不同浓度（6．25～100gmol／L）的Dgg处理骨肉瘤Saos-2细胞96h后，采用CCK-8法检测细胞增殖情况。用不同浓度（12．5～50gmol／L）的Dgg作用骨肉瘤Saos-2细胞24h后，分别采用FCM和Transwell小室法检测细胞凋亡、迁移和侵袭能力的变化。最后，采用蛋白质印迹法检测Dgg（12．5和25μmol/L）作用后，Saos-2细胞中核因子κB（nuclear factor—κB，NF-κB）／丝裂原活化蛋白激酶（mitogen—activated protein kinase，MAPK）通路相关蛋白以及该通路下游效应分子基质金属蛋白酶（matrix metalloproteases，MMPs）的表达水平。结果：Dgg可明显抑制骨肉瘤Saos-2细胞的增殖，诱导细胞凋亡，抑制细胞迁移和侵袭（P值均〈0．05），并呈浓度和时间依赖性。Dgg下调NF—κB信号通路中p38的磷酸化（P〈0．05），但不影响细胞外信号调节激酶（extracellular signal—regulated kinase，ERK）和c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N—terminal kinase，JNK）的磷酸化（P值均〉0．05）。Dgg抑制MAPK通路中磷酸化核因子κB激酶抑制蛋白（phospho—inhibitor of nuclear factor kappa—Bldnase，p-IKK）、磷酸化核因子κB抑制蛋白α（phospho—inhibitor of nuclear factor kappa—Bα，p-κBα）、IκBα和磷酸化p65（phospho—p65，p-p65）的表达（P值均〈0．05），并下调下游效应分子MMP-1、MMP-2和MMP-9的表达水平（p值均〈0．05）。结论：Dgg可抑制骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭，并促进细胞凋亡。这一作用可能与肿瘤细胞中NF—κB／MAPK信号通路被阻滞，以及MMPs表达被下调有关。