ANÁLISE DO EFEITO OVICIDA DO dsRNA QUITINA SINTASE NO MOSQUITO Aedes aegypti (DIPTERA: CULICIDAE)

Introducao: O mosquito Aedes aegypti e o principal vetor das arboviroses dengue, chikungunya, Zika e febre amarela. Para que ocorra a producao e a maturacao de ovos, as femeas do mosquito realizam o repasto sanguineo, quando ocorre a infeccao e transmissao viral. A melhor maneira de evitar a propagacao destas doencas e atraves do controle vetorial. Inseticidas quimicos sao utilizados no controle, entretanto, ao longo do tempo, os mosquitos adquirem resistencia a esses compostos. Neste contexto, o RNA de interferencia (RNAi) tem sido uma grande alternativa para o controle. Os genes de quitina sintase (CHSA e CHSB) sao considerados excelentes alvos de silenciamento, pois, nao sao transcritos em vertebrados e plantas. Objetivos: Analisar os efeitos do silenciamento dos genes CHSA e CHSB na oviposicao dos mosquitos tratados com dsRNACHS em baixas concentracoes. Materiaisemetodos: A producao de dsRNA foi feita in vivo atraves da transformacao de Escherichia coli, cepa HT115 com o plasmideo L4440, contendo o inserto para a regiao do sitio catalitico de CHSA e CHSB e GFP (gene nao-relacionado para mosquitos), usado como controle. Estas culturas foram lisadas com clorexidina 0,5%. O experimento foi feito em triplicata biologica, utilizando 10 larvas de 4° instar por grupo em 2 mL de agua. Foi utilizado, em ambas condicoes, a concentracao 2x10-5 µg/mL de celulas contendo dsRNACHS ou dsRNAGFP. Os mosquitos adultos sobreviventes foram alimentados com sangue de aves para testar a capacidade de oviposicao e a viabilidade dos ovos postos. Resultados: As femeas adultas oriundas das larvas tratadas com dsRNACHS tiveram menor postura de ovos, e estes apresentaram fenotipo de ressecamento e deformidades, acarretando baixa eclosao, quando comparados com o controle. Conclusoes: Concluimos que o dsRNACHS administrado afeta a producao e a qualidade dos ovos das femeas de Ae. aegypti, sendo uma boa estrategia de controle para este inseto.