Identificación proteómica de péptidos bacterianos en el líquido ascítico de pacientes con cirrosis y ascitis con cultivo negativo

La traslocacion bacteriana (TB) es el mecanismo propuesto para explicar el paso de bacterias a traves de la barrera intestinal en los pacientes con cirrosis y ascitis, y esta relacionada con una marcada actividad proinflamatoria que empeora el pronostico de estos pacientes. Sin embargo, la intensidad de la respuesta inmunologica frente a microorganismos viables o sus productos puede ser diferente. La viabilidad bacteriana en el liquido ascitico (LA) de pacientes con cirrosis y ascitis implica la presencia de proteinas de sintesis bacteriana en este medio biologico. El objetivo principal es, por tanto, la identificacion de signos de viabilidad bacteriana mediante deteccion de peptidos bacterianos en el LA de pacientes con cirrosis y ascitis con cultivo negativo y correlacionar su presencia con la respuesta inflamatoria en estos pacientes. Para ello, se analizo el contenido proteico del LA de pacientes con cirrosis descompensada (n=47) y de cepas bacterianas tipo frecuentes en estos pacientes, mediante electroforesis bidimensional en geles de poliacrilamida. Los mapas proteicos bidimensionales se compararon digitalmente utilizando PDQuest Advanced (Biorad) y la identificacion de peptidos bacterianos como posibles marcadores complementarios de traslocacion se realizo por espectrometria de masas (MALDI-TOF MS). Se valoro la respuesta inflamatoria asociada a traves de la determinacion por ELISA de los niveles de TNF-?, IFN-?, IL-12 y oxido nitrico (NOx) en muestras de LA de todos los pacientes. Los pacientes fueron distribuidos de acuerdo a la presencia (ADNbact+, n=16) o ausencia (ADNbact-, n=31) de ADN bacteriano simultaneamente en sangre y LA. De los 16 pacientes (ADNbact+), 8 (50%) presentaron evidencias de viabilidad bacteriana al mostrar peptidos bacterianos en el contenido proteico del LA. Los niveles de citocinas y NOx se mostraron significativamente mas altos en pacientes con peptidos bacterianos que en aquellos sin presencia de peptidos. Por lo tanto, este trabajo demuestra la viabilidad bacteriana en un subgrupo de pacientes con cirrosis y ascitis, a traves de la identificacion de peptidos bacterianos y que su presencia se asocia a un incremento en los niveles de mediadores proinflamatorios.