ERK1／2MAPK通路在TIMP-1抑制高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞凋亡中的作用

目的探讨细胞外信号调节激酶（ERK1／2）丝裂原激活蛋白激酶（MAPK）通路在基质金属蛋白酶1组织抑制剂（TIMP-1）抑制高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞凋亡中的作用。方法将人正义、反义TIMP-1用脂质体法转染大鼠肾小球系膜细胞,并将细胞分为正常对照组、未转染组、空载体组、正义转染组和反义转染组。各组细胞分别用高糖（25mmol／L）和（或）MEK（ERK1／2通路中的MAPK激酶）特异性抑制剂PD98059（50μmol／L）刺激24h。应用透射电镜观察细胞内部结构变化。Western印迹观察磷酸化（P）的ERK1／2、P90rsk、Bad及总的P90rsk、Bad、Bcl-2蛋白的表达。结果加入PD98059后．各组细胞内可见凋亡小体形成、细胞皱缩、核固缩、染色体边集及膜泡样突变等现象，与未转染组比较，以反义转染组最明显，凋亡细胞数目最多；正义转染组细胞形态改变不十分明显，凋亡细胞数目相对较少。此外，加入PD98059后，ERK1／2、P90rsk、Bcl．2及Bad的磷酸化明显减少（P〈0．05），ERK1／2和P90rsk的磷酸化以正义转染组最明显（P〈0．01）；总P90rsk、总Bad表达量在各组之间无显著差异。结论ERK1／2通路在TIMP-1抑制高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞凋亡过程中起重要作用。