Long-term culture of free or encapsulated islets isolated from specific pathogen-free (SPF) pigs

Culture a long terme d'ilots, libres ou encapsules, isoles a partir de pancreas de porcs exempts d'organismes pathogenes specifiques (EOPS), Un des facteurs limitant la xenotransplantation est le risque de contamination du receveur par des agents pathogenes provenant du greffon d'origine animale. C'est pourquoi l'utilisation de porcs exempts d'organismes pathogenes specifiques est une necessite. Les buts de cette etude etaient: 1) de demontrer la possibilite de conserver en culture pendant plusieurs mois des ilots de porcs EDPS fonctionnels, 2) d'evaluer la production en insuline d'ilots de porcs EOPS encapsules dans des fibres creuses d'AN69. L'etude de l'insulino-secretion a ete realisee par incubation statique de 45 minutes en presence de 2,8, 5,5, 11 et 16,5 mM de glucose apres des periodes de culture de 3 semaines (n = 10), 2 (n = 8) et 3 mois (n = 3). Bien que la quantite d'insuline secretee diminue avec le temps de culture (1385 ± 421 et 4323 ± 1068μU/ml a 3 semaines, en presence de 2,8 et 16,5 mM de glucose, respectivement; 702 ± 261 et 2397 ± 1047μU/ml a 2 mois; 59 ± 23 et 154 ± 34 μU/ml a 3 mois), la secretion d'insuline est dans tous les cas fonction de la concentration en glucose avec des index de stimulation de 8,1 ± 3,1 (p < 0,05 vs l'index de stimulation calcule en presence de 5,5 mM de glucose) a 3 semaines, 3,3 ± 1,1 a 2 mois et 3,0 ± 0,7 a 3 mois. La secretion d'insuline d'ilots de porcs EOPS encapsules a ete evaluee par perifusion avec un stimulus de 10 mM de glucose plus 5,5 mM de theophylline. La stimulation par le glucose a provoque une augmentation de la secretion d'insuline correspondant a 2 fois la secretion en milieu basal (p < 0,05). Cette reponse est conservee apres 3 semaines de culture. Ces resultats indiquent qu'il est possible de maintenir fonctionnels des ilots de porcs EOPS en culture pendant plusieurs semaines qu'ils soient libres ou encapsules. Cependant, la secretion d'insuline diminue fortement au bout de trois mois de culture. Diabetes & Metabolism 1998, 24, 517-522.