Clonage et caractérisation de protéines associées à la RNase L. Identification d'ARNm cellulaires régulés par la RNase L

Les interferons (ifns) induisent de nombreux genes impliques dans le controle de la proliferation et de la differenciation cellulaires, ainsi que dans la modulation des reponses immunitaires et dans la defense contre l'infection virale. Le systeme 2-5a/rnase l est un des systemes induit par les ifns. L'ifn induit l'expression des genes 2-5a synthetases qui, activees par des arns double-brin (viraux ou cellulaires), polymerisent l'atp en une serie d'oligoadenylates relies par des liaisons phosphodiesters 2'-5' (2-5a). Le 2-5a active une endoribonuclease latente, la rnase l, qui degrade les arns simple brin, entrainant une inhibition de la synthese proteique. L'activite de la rnase l est regulee par le 2-5a et par son inhibiteur proteique, rli (rnase l inhibitor). Afin d'elucider le mecanisme d'action de la rnase l, nous avons clone des partenaires de la rnase l. Nous avons identifie, par purification biochimique suivie d'un microsequencage, une proteine associee a la rnase l impliquee dans la terminaison de la traduction. Parallelement, par la technique du double-hybride, nous avons clone un autre partenaire de la rnase l, implique dans l'initiation de la traduction mitochondriale : if2-mt. L'etude des partenaires de la rnase l nous a amene a etudier le role de la rnase l dans la metabolisme des arnm mitochondriaux. Notre etude montre que la rnase l et son inhibiteur sont presents dans les mitochondries et que la rnase l est impliquee dans l'effet antiproliferatif de l'ifn via la degradation des arnm mitochondriaux.