Caractérisation et étude des conséquences biologiques du photoblanchiment de l'hématoporphyrine dérivée utilisée en thérapie photodynamique
1995
La photodegradation de l'hematoporphyrine derivee (HpD) est caracterisee par une modification du spectre d'absorption, une diminution de l'intensite de fluorescence, ainsi qu'une alteration du pouvoir de photoinactivation cellulaire. A partir de ces trois criteres, seront evaluees les constantes de photodegradation de l'HpD dans deux environnements biologiques differents. In vitro : sur solutions d'HpD supplementees de serum (2%). Le taux de photodegradation le plus important est obtenu a partir des essais de cytotoxicite cellulaire (test au MIT) suggerant que le systeme biologique d'estimation du photoblanchiment est le plus sensible. In vivo : sur tumeurs HT29 greffees sur souris et exposees a differentes fluences en lumiere bleue ou en lumiere rouge. Malgre sa faible profondeur de penetration dans les tissus, la lumiere bleue induit un taux de photodegradation superieur a celui de la lumiere rouge et elle semble par ailleurs reagir selon un processus radicalaire qui gagnerait tout le volume tumorale. L'HpD etant proposee en therapie photodynamique (PDT) pour le diagnostic et le traitement des neoplasies, notre second objectif est de demontrer in vitro et in vivo si l'illumination de l'HpD a visee de diagnostic (λ<415 nm) peut alterer l'efficacite de l'etape therapeutique successive (λ=630 nm). In vitro : les essais sur culture de cellules ont demontre que l'exposition sequentielle aux deux lumieres diminuait la cytotoxicite. Cette interaction negative peut etre modifiee par la production de photoproduits avec une faible activite photodynamique dont l'existence a ete confirmee par la detection de nouveaux pics d'absorption et de fluorescence. In vivo : l'evolution du volume tumoral apres exposition sequentielle aux deux lumieres est plus rapide que celle des temoins exposes a une seule photoirradiation. Aucune relation directe ne permet de lier l'alteration de l'activite photodynamique aux resultats obtenus par les autres methodes d'evaluation du photoblanchiment. Seule l'evaluation des consequences biologiques peut fournir une reponse objective.
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