白念珠菌β-葡萄糖苷酶2的原核细胞表达、鉴定及免疫反应性

目的：构建白念珠菌β-葡萄糖苷酶2（BGL2）的原核细胞表达质粒，诱导其表达后加以鉴定，并初步判定重组蛋白质的免疫反应性。 方法：PCR法获取白念珠菌SC5314的bgl2基因，插入原核细胞表达载体pET30a中，以重组质粒转染感受态细胞大肠埃希菌（E.coli） BL21，经IPTG诱导表达后，SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）检测蛋白质的表达情况，梯度透析法对包涵体蛋白质复性，用抗His标签单克隆抗体鉴定。用临床侵袭性念珠菌病（IC）患者血清判定重组蛋白质的免疫反应性。 结果：成功构建原核细胞表达质粒pET30a-bgl2，诱导后的重组蛋白质以包涵体形式表达，经梯度透析复性成功。重组蛋白质能被抗His标签抗体识别，并与IC患者血清有良好的反应性。 结论：用原核细胞表达体系成功表达了白念珠菌BGL2，该蛋白质具有良好的免疫反应性，为进一步研究其在IC诊断中的作用打下基础。