骨碎补总黄酮对高糖作用下成骨细胞分化及ERK_（1/2）和p38蛋白激酶表达的影响

目的：研究骨碎补总黄酮（TFDF）对高浓度葡萄糖作用下成骨细胞（OB）分化活性及对细胞外信号调节蛋白激酶（ERK1/2）和p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）信号蛋白的影响,为TFDF能否用来防治糖尿病性骨质疏松提供细胞分子学依据。方法：二次酶消化法分离培养新生SD大鼠颅骨OB及活性观察;MTT法检测TFDF对OB的细胞毒性,确定实验药物在培养基中的添加剂量;pNPP、ELISA、茜素红染色法分别检测不同浓度葡萄糖对OB碱性磷酸酶活性（ALP）、Ⅰ型胶原（ColⅠ）、骨钙素（BGP）以及矿化能力的影响,并观察TFDF对高糖作用下OB分化活性的干预作用;Western-blot检测TFDF对高糖作用下OB ERK1/2和p38蛋白磷酸化的情况。结果：原代分离培养新生SD大鼠OB,具有典型的OB分化特性;根据TFDF对OB的毒性试验,选择TFDF的浓度25、50、100 mg/L为实验梯度浓度;葡萄糖（25、50 mmol/L）可以降低OB表达ALP、ColⅠ、BGP,降低其矿化能力;TFDF能剂量依赖性的提高高糖（25 mmol/L）作用下OB表达ALP、ColⅠ、BGP和矿化能力;TFDF（50 mg/L）能提高高糖（25 mmol/L）作用下p38和ERK1/2的蛋白磷酸化。结论：高糖可以降低OB分化和矿化能力,TFDF可提高高糖作用下OB的分化和矿化能力,其作用机理可能和提高p38和ERK1/2信号蛋白的磷酸化有关。