Nouveaux criteres d'evaluation de la viabilitedes hematies destinees ala transfusion Novel criteria for assessing red blood cell viability in blood banks

Re´sume´Les recherches que nous avons effectue´es ont pour but d’e´lucider le proble`me de la rapide clairance des he´maties transfuse´es en nous fondantsur nos connaissances actuelles des me´canismes de la mort programme´e de ces cellules.Mate´riels et me´thodes.– Nous avons mis au point de nouveaux crite`res de viabilite´ des he´maties essentiellement fonde´s sur l’utilisation de lacytome´trie en flux. Associe´s aux crite`res classiques de dosage de l’ATP et de la mesure de l’he´molyse, ils ont e´te´ applique´sa` des he´maties stocke´esen milieu SAGM pendant six semaines.Re´sultats et conclusions.– L’application d’un proce´de´ original d’e´rythrophagocytose in vitro a montre´ qu’une importante proportion d’he´matiese´taient phagocyte´es alors qu’elles ne pre´sentaient aucun des signaux classiques de se´nescence et de phagocytose avec, en particulier, l’absence dede´sialylation, marqueur de capture, un tre`s faible taux d’externalisation de la phosphatidylse´rine, marqueur de phagocytose et la persistance dure´cepteur CD47, signal d’antiphagocytose. En outre, l’ATP e´tait encore pre´sent dans les cellules. La solution de l’e´nigme est venue de lamicroscopie e´lectronique de balayage qui a re´ve´le´ la pre´sence de quantite´s importantes de sphe´roe´chinocytes, seules he´maties phagocytables dontil reste, a` pre´sent, a` de´couvrir l’origine.# 2007 Elsevier Masson SAS. Tous droits re´serve´s.AbstractIn light of recent results on the mechanism of programmed cell death of human red blood cells (RBC), the aim of the present study was to solvethe enigma of the rapid clearance of transfused RBCs.Materials and methods: We describe new criteria of RBC viability founded on the use of flow cytometry. They were applied, in association withthe classical ones: ATP and hemolysis measurements, to RBCs stored in SAGM medium for 42 days.Results and conclusions: Application of an original method of flow cytometric quantitation of in vitro erythrophagocytosis showed that animportant proportion of stored RBCs were phagocytized although the following classical signals for phagocytosis were absent, i.e.: desialylation,phosphatidylserine exposure inthe outerleaflet ofthe RBC membrane,loss of CD47receptor,anantiphagocytosissignal. Inaddition, ATPwas stillpresent and hemolysis was very low. This enigma was solved by the use of scanning electron microscopy, which showed the disappearance ofdiscocytes and the presence of an important proportion of spheroechinocytes, which are the phagocytable forms of RBCs. The mechanism of thisdramatic morphological transformation remains to be elucidated.# 2007 Elsevier Masson SAS. Tous droits re´serve´s.