PROPOSIÇÃO DE UMA NOVA METODOLOGIA PARA ISOLAMENTO E CULTIVO DE CÉLULAS-TRONCO MESENQUIMAIS DERIVADAS DO TECIDO ADIPOSO

Introducao: As celulas-tronco mesenquimais (CTM) tem despertado interesse de varios grupos de pesquisa em funcao do grande potencial de aplicabilidade em terapia celular e medicina regenerativa. Nesse contexto, o tecido adiposo vem recebendo grande destaque como importante fonte para obtencao de CTM. Os protocolos utilizados atualmente para o isolamento das celulas-tronco derivadas do tecido adiposo (ADSC) empregam, de forma geral, o metodo de digestao enzimatica com colagenase extraida de bacteria (Clostridium histolyticun), que pode conter contaminantes, como endotoxinas e outros peptideos que, eventualmente, poderao resultar em reacoes adversas nos procedimentos de terapia celular em pacientes humanos. Objetivo: Pretendeu-se no presente estudo adequar e propor uma nova abordagem empregando a metodologia de dissociacao mecânica para isolamento de CTM derivadas de tecido adiposo de ratos. Metodos: As celulas cultivadas foram analisadas quanto ao potencial de adesao, proliferacao e tempo de duplicacao celular, por meio de uma curva de crescimento. As celulas isoladas e cultivadas a partir do tecido adiposo foram tambem analisadas quanto ao potencial de diferenciacao in vitro nas linhagens adipogenica, condrogenica e osteogenica. Resultados: Os resultados mostraram que o tempo de duplicacao (velocidade de crescimento) da populacao celular isolada por dissociacao mecânica e mais expressivo quando comparado com a tecnica de digestao enzimatica. As celulas isoladas do tecido adiposo apresentaram potencial de diferenciacao nas linhagens osteogenica, condrogenica e adipogenica. Conclusao: Os resultados obtidos permitem concluir que a metodologia de dissociacao mecânica apresenta-se como uma alternativa viavel, de baixo custo e, como tal, extremamente promissora no sentido de permitir que a colagenase de origem bacteriana (Clostridium histolyticun) torne-se um componente prescindivel para isolamento e cultivo de celulas provenientes do tecido adiposo.