二肽酰肽酶-4抑制剂通过PKA/NF-κB信号通路调节LPS诱导的RAW264.7细胞炎症反应的实验研究

目的 探讨二肽酰肽酶-4（DPP-4）竞争性抑制剂沙格列汀对LPS诱导的小鼠巨噬细胞（RAW264.7细胞）炎症反应的调节作用及相关的分子机制。方法 将RAW264.7细胞分为4组,分别为对照组（Control组）、LPS组、LPS＋沙格列汀（LPS＋SAX组）和LPS＋沙格列汀＋PKA抑制剂H-89组（LPS＋SAX＋H-89组）。在干预6小时后使用qPCR法和western blot法对细胞ICAM-1mRNA和蛋白的表达水平进行检测;并采用western blot法对细胞PKA和NF-κB p65活化水平进行分析。结果 与Control组相比较,在LPS干预6小时后RAW264.7细胞ICAM-1mRNA和蛋白的表达水平及NF-κB p65活化水平均明显上升,而PKA活化水平明显降低,差异均有统计学意义（P均〈0.05）;但LPS组较LPS＋SAX组ICAM-1表达和NF-κB p65活化水平的增加更明显,而PKA活化下降更加明显,差异均有统计学意义（P均〈0.05）。同时发现在LPS诱导状态下沙格列汀对于ICAM-1表达和NF-κB p65活化水平的抑制作用和PKA活化水平的促进作用可被PKA抑制剂H-89显著拮抗,差异均有统计学意义（P均〈0.05）。结论 本研究显示DPP-4抑制剂可以通过调控PKA/NF-κB信号通路下调LPS诱导的小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞的炎症反应,为DPP-4抑制剂应用于炎症性疾病的治疗奠定了初步的理论基础。