Mouse-isolated plexus differentiates neural crest precursors into enteric neuroblasts

Le but de cette etude est d'apprecier pour la premiere fois si le plexus enterique de souris nouveau-ne isole peut induire in-vitro la differenciation de la crete neurale vers des neuroblastes enteriques. Des fragments de plexus myenteriques etaient isoles de l'intestin de souris Swiss de 6 jours de vie et etaient conserves dans un milieu DMEM-F12, puis cultives sur un support de fibronectine humaine polymerise. La portion sympathique du tube neural, isolee chez un embryon de souris Swiss de 9,5 jours etait pose dans la meme culture avec le plexus myenterique isole et etait cultive pendant 3 jours. Les cellules de la crete neurale sympathique migraient dans le plan de Fibronectine humaine polymerisee et constituaient une couronne de cellules autour du tube neural. Apres 6 jours, les cultures etaient stoppees et une etude immuno-histo-chimique par anti-NF160 KD, anti-TH et anticorps RetR5 pour analyser les differents stades des cellules cultivees etait realisee. L'analyse des resultats incluait la comparaison de deux groupes de culture: Groupe 1 utilise comme controle, dans lequel les cellules derivees de la crete neurale sympathique etaient posees dans un milieu DMEM-F12 supplemente seulement avec 10% de FCS; Groupe 2 dans lequel les cellules derivees de la crete neurale sympathique etaient posees dans le meme milieu que le Groupe 1 avec en plus les fragments isoles de plexus myenterique de souris nouveau-ne pour realiser la co-culture. Les resultats suivants etaient obtenus: dans le groupe 1, le tube neural produisait une population cellulaire fortement positive pour anti-NF160 et anti-TH Ab mais negatif pour RetR5 Ab. Cette positivite etait trouvee a la fois dans les cellules proches du tube neural et dans celles migrant en peripherie. Les cellules du Groupe 2 apres migration etaient positives pour anti-NF160 et les anticorps anti-TH. De plus, dans ce groupe de culture, les cellules ayant migre du tube neural etaient positives pour les anticorps anti-RetR5. La co-culture utilisee dans cette etude induit la differenciation de cellules sympathiques en neuroblastes enteriques, cellules TH+ et RetR5 +. Ces cellules, comme c'est connue, apres avoir atteint l'intestin embryonnaire, migrent et colonisent l'intestin et forment l'ENS. Cette biotechnologie semble une bonne methode pour obtenir in-vitro des precurseurs enteriques d'ENS.