Avaliação do metabolismo oxidativo em Pitcairnia encholirioides L. B. Sm. (Bromeliaceae) in vitro e ex vitro e sob desidratação

Bromeliaceae e uma familia essencialmente neotropical, cujos representantes sao muito utilizados para fins paisagisticos. Uma das principais fontes de abastecimento do mercado consumidor de bromelias e o extrativismo o que, associado a destruicao do ambiente natural, tem levado a perdas irreparaveis na biodiversidade da familia, especialmente na Mata Atlântica, onde cerca de 40% das especies encontram-se sob alguma categoria de ameaca. Pitcairnia encholirioides L. B. Sm. e uma especie “criticamente em perigo” de extincao, sendo conhecida somente uma populacao dessa especie, com cerca de 900 individuos, encontrada em 2004 em um afloramento rochoso muito degradado e sujeito ao fogo e ao pisoteio de animais, no municipio de Santa Maria Madalena, RJ. A utilizacao das tecnicas de micropropagacao pode reverter os riscos de extincao garantindo taxas elevadas de multiplicacao, fornecendo material necessario ao mercado consumidor, evitando, dessa forma, o extrativismo das plantas nos seus locais de origem. A instalacao e a conservacao in vitro de bancos de germoplasma possuem especial importância, garantindo a sobrevivencia de especies raras e/ou endemicas e fornecendo plantas para iniciativas de reintroducao. A etapa final da micropropagacao e a aclimatizacao ex vitro, realizada apos os procedimentos de multiplicacao e enraizamento in vitro. A aclimatizacao e um periodo critico para as plantas devido a perda de agua, o que causa estresse hidrico e, como consequencia, estresse oxidativo, podendo provocar problemas metabolicos e perdas elevadas. No presente trabalho, Pitcairnia encholirioides foi cultivada in vitro por 150 dias em meio de cultura adicionado de dois reguladores de crescimento (GA3 ou ANA), alem de duas concentracoes de sacarose (15 ou 30 g L-1) e sob dois tipos de vedacao dos tubos de ensaio (vedacao hermetica com tampas e filme de PVC ou vedacao com tampas que permitiam trocas gasosas), totalizando 8 tratamentos, periodo apos o qual as plantas foram transferidas para condicoes ex vitro, em casa de vegetacao, permanecendo por mais 180 dias. Dois desses tratamentos foram selecionados para as analises de desidratacao, quando suas plantas foram submetidas a 30, 42 ou 54 dias sem irrigacao, alem do controle irrigado periodicamente, sendo posteriormente reidratadas durante 90 dias. Apos os periodos de cultivo in vitro e permanencia das plantas em casa de vegetacao, foram realizadas analises dos conteudos de prolina, proteinas totais, atividades das enzimas do metabolismo antioxidativo SOD, CAT, POD e PPO, alem 2 dos teores de pigmentos fotossintetizantes. Alem desses parâmetros, apos desidratacao e reidratacao foram tambem avaliados os teores de carboidratos. De maneira geral, o cultivo in vitro em meio adicionado da menor concentracao de sacarose e em tubos vedados hermeticamente se mostrou prejudicial, o que foi evidenciado pelo menor acumulo de prolina, aumentos nas atividades das enzimas antioxidativas e menor acumulo de pigmentos fotossinteticos. Apos o periodo de aclimatizacao, nao foram encontradas diferencas entre os tratamentos para a maioria dos parâmetros analisados, ou os dados oscilaram de maneira a nao permitir uma generalizacao quanto aos efeitos residuais da sacarose, do tipo de tampa e dos reguladores de crescimento utilizados durante o cultivo in vitro. No periodo em que as plantas foram submetidas a desidratacao progressiva, houve maior acumulo de prolina e proteinas soluveis totais, alem de aumento nos teores de pigmentos fotossinteticos nos tecidos provenientes de plantas cultivadas in vitro em meio contendo 30 g L-1 de sacarose e GA3. Houve tambem, em geral, queda mais acentuada nas atividades das enzimas em meio suplementado com a menor concentracao de sacarose e ANA, alem de oscilacoes nos teores de pigmentos. As relacoes entre os pigmentos sofreram leve reducao em ambos os tratamentos, e os teores de carboidratos soluveis totais, sacarose, acucares redutores e amido aumentaram com o prolongamento do estresse. Apos a reidratacao, todas as plantas demonstraram elevada capacidade de recuperacao, apresentando em todas as analises realizadas valores muito similares aos das plantas do controle, nao submetidas a desidratacao. Os resultados obtidos no trabalho permitem concluir que o cultivo in vitro em meio adicionado de 30 g L-1 de sacarose e em tubos de ensaio que permitem trocas gasosas e o mais apropriado para plantas de P. encholirioides. Ademais, a concentracao de sacarose adicionada ao meio de cultura tambem influencia o desenvolvimento das plantas apos aclimatizacao, sendo encontrados melhores resultados em plantas cultivadas nos meios de cultura suplementados com a maior concentracao desse carboidrato. Acredita-se que as plantas cultivadas nessas condicoes apresentariam maior capacidade de sobrevivencia ao transplantio e maior resistencia a periodos prolongados de estresse hidrico, aos quais, frequentemente, estao submetidas no ambiente natural.