Toxicidad in vivo y proteómica comparativa para el es dio de la ex resión de proteínas con actividad insectici a presentes en semillas de Phaseolus vulgaris L. In vivo Toxicity and Comparative Proteomics for the Study of Insecticidal Protein Expression in Seeds of Phaseolus vulgaris L.

Las caraotas (Phaseolus vulgaris) son una de las fabaceas mas cultivadas en el mundo y tienen gran importancia desde el punto de vista nutriciona1. Esta caracteristica las hace blanco de ataques por insectos como bruquidios, particularmente las especies Acanthoscelides obtectus y Zabrotes subfasciatus. Estos ultimos causan graves danos a la semilla por lo que dis­ minuye la calidad y cantidad de granos producidos. Por tal motivo, es oportuno desarrollar una estrategia para combatir estas plagas. Ciertas proteinas presentes en las fabaceas (como la fitohemaglutinina, los inhibidores de a-amilasa y las arcelinas) afectan a los insectos y confieren una resistencia natural al ataque de las semillas. En geles bidimensionales se observo el proteoma de los endospermos de diferentes variedades de caraota, a fin de ubicar y comparar la expresion de proteinas. Se realizo un bioensayo con el gorgojo de arroz (Sitophilus oryzae) como modelo, para estimar la toxicidad de semillas de diferentes variedades. Se obtuvieron tres grupos de resultados: semillas de toxicidad alta, moderada y baja. Las variedades Tacarigua, Victoria y MGM-oS-02-026 resultaron las mas toxicas y Tenerife y DOR-soo, las menos daninas para los insectos. Las electroforesis en dos dimensiones mostraron grupos de proteinas comunes para las variedades de semillas toxicas, ausentes en las variedades no toxicas. Todo ello supone una correlacion entre la presencia de proteinas insecticidas y la toxicidad de las semillas, lo cual nos aproxima a la identificacion de variedades venezolanas resistentes a plagas de almacenamiento. Palabras clave Phaseolus vulgaris L., lectinas, proteomica comparativa, bioensayo, plagas de almacenamiento. Common bean (Phaseo!us vu!garis) is the most important Fabaceae in the world for some of its nutritional facts such as proteins. These characteristics make the seeds of Phaseolus susceptible to the attack of insects such as Acanthosce!ides obtectus and Zabrotes subfasciatus. This harvest plagues affect the quality and quantity of seed production. Therefore, it is time for the development of new defense strategies against plagues. Some kinds of proteins present in Fabaceaes are toxic for the insects and confer resistance to seeds. Using bidimensional gel, we observe the proteome of different endosperms in commercial Phaseolus vulgaris varieties; the proteins were localized and compared to the expression. The bioassay with rice plague (Sitophilus oryzae) was used as a model to estimate the toxicity of the seeds. Three groups of seeds were obtained as a result: high-toxicity seeds, moderate-toxicity seeds and low-toxicity seeds; thus, the varieties Tacarigua, Victoria and MGM-OS-02-026, were the most toxic for the rice plague. Bidimensional electrophoresis shows some groups of similar proteins in toxic seeds that are not observed in non toxic varieties. We assumed there was some kind of association between the expression of insecticidal proteins and its toxicity over plagues. With this proteomic approximation we can identify varieties that are resistant to harvest plagues in Venezuelan seeds of P. vulgaris.