Immunoelectron Microscopy for Locating Calvin Cycle Enzymes in the Thylakoids of Synechocystis 6803

单细胞的 cyanobacteria Synechocystis 6803 用高压的结冰被修理(HPF ) 并且没有任何化学药品，冻结替换跨连接器。这些房间的 Immunoelectron 显微镜学证明喀尔文的五顺序的酶骑车(phosphoriboisomerase， phosphoribulokinase， ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase (RuBisCO ) ， 3-phosphoglyceratekinase 和 glyceraldehyde-3-phosphate 脱氢酶) 并且叶绿体 H+-ATP synthase (CF1 ) 的催化部分被定位邻近 thylakoid 膜。Synechocystis 的没有房间的摘录被 ultracentrifugation 处理在 40 点孤立 thylakoid 部分 sedimenting ? 000， 90 ? 000，和 150 ? 000 ? g。在这些之中， 150 ? 000-g 部分显示出上述五顺序的加尔文周期酶并且也的最高连接的活动由 ribose-5-phosphate (R-5-P ) 估计了的轻、黑暗的反应的最高协调的活动 +ADP 依赖 CO2 固定。这膜部分标记的 Immunogold 象 CF1 ATP synthase 的催化部分一样证实了上述五酶的存在。尤其是，没有跨连接器的化学药品的使用， thylakoids 标记的蛋白质 A 黄金被观察，尽管有洗的正常，步在标准 immunolabeling 期间使用了。结果证明可溶的加尔文周期酶可能沿着 thylakoid 膜被组织。