Arn guides protégés (pgrnas)

La presente invention concerne des systemes, des methodes et des compositions pour modifier l'expression de sequences genetiques cibles et de produits genetiques associes. L'invention concerne des informations structurales sur la proteine Cas du systeme CRISPR-Cas, l'utilisation de ces informations pour generer des constituants modifies du complexe CRISPR, des vecteurs et des systemes de vecteurs codant pour un ou plusieurs constituants ou constituants modifies d'un complexe CRISPR, ainsi que des methodes de conception et d'utilisation de tels vecteurs et constituants. L'invention concerne par ailleurs des procedes pour diriger la formation du complexe CRISPR dans des cellules eucaryotes et des procedes d'utilisation du systeme CRISPR-Cas. En particulier, la presente invention concerne des systemes enzymatiques CRISPR-Cas fonctionnels optimises, dans lesquels la sequence guide est modifiee par une structure secondaire afin d'augmenter la specificite du systeme CRISPR-Cas et ladite structure secondaire peut proteger contre l'activite exonuclease et permettre des ajouts a l'extremite 5' de la sequence guide.