孤儿核受体hB1F／hLRH-1铰链区一个保守结构域对其转录功能的抑制作用

孤儿核受体hB1F(NR5A2，也称之为LRH-1、CPF或FTF)在胆汁酸合成代谢、乙肝病毒基因和部分肝特异性基因表达的调控中起着重要的作用。为理解hB1F激活转录的分子机制，对其铰链区潜在的功能结构域进行了分析。利用GAL4-DBD融合的hB1F缺失片段所进行的报告基因分析，发现了一个位于铰链区的强烈抑制hB1F反式激活能力的结构域。该结构域核心残基的定点突变导致了hB1F反式激活能力的显著上升，而且明显地增强hB1F对乙肝病毒增强子Ⅱ／核心启动子的转录激活能力。生物信息学分析显示该结构域不存在明显的二级结构，但有意思的是，其氨基酸序列在核受体FTZ-F1亚家族的成员中高度保守，且不见于其他蛋白质中。转染分析发现，该结构域的抑制活性存在于测试的五个不同细胞株中，但抑制的强度表现出明显差异。半定量RT—PCR分析表明，与SF-1不同，该结构域抑制转录活性的强度与潜在的结合因子DP103的表达水平之间没有相关性。共转染实验还表明，参与hB1F转录活性调控的辅激活子SRC—1和辅抑制子SMRT与该抑制作用不直接相关。实验结果提示，孤儿核受体hB1F转录活性可能存在一种新的调控机制。