日本血吸虫谷胱甘肽-S-转移酶在虫卵阶段的定位

目的探讨谷胱甘肽-S-转移酶（Sj26GST）在虫卵阶段的表达、定位和重组蛋白（rSj26GST）的免疫诊断价值。方法从感染日本血吸虫尾蚴6周的兔肝脏中分离虫卵，分别用RT-PCR和免疫印迹（Westernblotting）法检测Sj26GST基因在虫卵阶段的转录和翻译；同时用兔肝做免疫组化观察Sj26GST在虫卵内的分布。利用纯化的rSj26GST和日本血吸虫可溶性虫卵抗原（SEA），采用间接ELISA法检测急、慢性血吸虫病患者和正常人血清。结果RT-PCR从血吸虫虫卵中扩增670bp的基因片断，Westernblotting证明在虫卵阶段Sj26GST的表达；同时免疫组化显示Sj26GST主要分布在虫卵内毛蚴两边的侧腺。rSj26GST检测急、慢性血吸虫病患者和正常人血清的阳性率分别为92％、80％和0；用SEA检测以上标本，阳性率分别为96％、84％和2％。结论Sj26GST是SEA的主要组分之一，能刺激机体产生高滴度的抗体；rSj26GST为抗原诊断日本血吸虫病显示出高度的敏感性和特异性，具有实用价值。