应用膜片钳技术检测药物对 HERG 通道抑制作用的实验过程及要点

目的：应用膜片钳技术检测药物对人类 ether-a-go-go 相关基因（human ether-a-go-go-related gene，HERG）编码的钾离子通道的作用。探讨离子电流记录过程及实验要点。方法选择稳定转染并表达人源心肌 HERG 离子通道的 HEK293细胞，通过全细胞记录方式，记录 HERG 电流。结果成功记录到 HERG 步阶电流和尾电流，步阶电流的Ⅰ－Ⅴ曲线表现为特征性的倒钟形结构，尾电流在去极化时迅速上升，在＋10 mV 时接近峰值。阳性药物 E-4031能明显阻断 HERG 电流。检测的化合物 A 对 HERG 电流具有抑制效应，半数抑制浓度 IC50为109μmol／L。结论体外HERG 实验可直接检测药物对 HERG 电流的抑制作用，膜片钳的正确操作及电流记录是实验成败的关键因素。