El Mycobacterium avium subesp. paratuberculosis disminuye la regulación de la expresión del ARNm de la ferroportina 1 en los macrófagos inducidos con hierro

espanolMycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) is the causative agent of Johne’s disease. The mechanisms by which MAP is able to adapt to the innate host response are still unclear. We examined Ferroportin 1 (FPN1) mRNA expression levels via real-time PCR of the mouse macrophage cell line J774 that was incubated in the presence of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) or MAP crude protein extract. Infection with live MAP decreased FPN1 mRNA levels in a multiplicity of infection (MOI)-dependent fashion. Macrophages infected with MOIs of 20:1 and 15:1 did not show any change in FPN1 gene expression, whereas MOIs of 10:1 and 5:1 induced a decrease of 50 and 80%, respectively. Macrophages treated with 50, 100, 150 and 200 µg/mL of MAP crude extract (ATCC19698) decreased FPN1 mRNA expression by 25%. Additionally, up-regulation of FPN1 mRNA by an iron overload treatment of 400 µM of ferric nitrilotriacetate (FeNTA) was abrogated by live MAP (MOI 20:1) by approximately 70%. Our data revealed an inhibitory effect of MAP on FPN1 mRNA and suggested a bacterial mechanism that may play a role in host iron regulation. MultipleEl Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (map) es el agente causal de la enfermedad de Johne. Los mecanismos por los cuales map es capaz de adaptarse a la respuesta natural del huesped aun no estan claros. A traves de la pcr en tiempo real, se examinaron los niveles de expresion del arn de la ferroportina 1 (fpn1) en celulas de macrofagos de raton J774 infectados con Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis o con el extracto crudo de proteina (ecp) de map. La multiplicidad de infeccion (moi) con map dependio de la disminucion de los niveles del arnm de la fpn1. Los macrofagos infectados con las moi de 20:1 y 15:1 no mostraron cambio alguno en la expresion del gen fpn1, mientras que en las moi de 10:1 y 5:1, disminuyo en un 50% y 80%, respectivamente. En los macrofagos tratados con 50, 100, 150 y 200 µg/mL de ECP de map (ATCC19698), la expresion del arnm de fpn1 disminuyo 25%. La sobreexpresion del arnm de fpn1 en macrofagos J774 tratados con una sobrecarga de hierro de 400 µM de nitrilotriacetato ferrico (fenta) se suprimio cerca de un 70% por la infeccion con map viva (moi 20:1). Estos datos revelaron que map inhibe la expresion del arnm de fpn1, lo que sugiere que existe un mecanismo bacteriano que participa en la regulacion del hierro del huesped.